Y90对比非Y90组的肿瘤TILs免疫谱

2.Y90激活肿瘤内的免疫通路

肿瘤二代测序分析发现，Y90治疗组相比对照组有88%的基因高表达，这些基因与免疫应答有关，涉及II型MHC分子的抗原提呈、T细胞激活、NK细胞激活、NKT细胞向肝脏募集等。而对照组的富集基因与免疫通路无关。这与上述的流式细胞结果一致，表明Y90治疗促进了肿瘤内的T细胞、NK细胞、NKT细胞的激活和募集。

Y90对比非Y90组的肿瘤二代测序和通路分析结果

3.Y90诱导CD8+T细胞趋向肿瘤微环境

肿瘤qPCR与NGS结果一致显示，Y90治疗组中与趋化相关的CXCL16和CCL5表达上调，说明Y90治疗可诱导趋化通路的激活。为进一步确证激活T细胞的趋化效应，将CCL5和CXCL16的RNA表达谱与TILs中的免疫细胞亚群进行关联性分析，发现CCL5和CXCL16与激活的GB+CD8+T细胞比例呈正相关。该结果证明了Y90重塑HCC免疫微环境的能力，可诱导细胞死亡、T细胞的募集和激活。

Y90诱导的CCL5和CXCL16相关趋化通路激活

4.Y90诱导早期和晚期免疫应答

为探索Y90诱导的系统免疫应答，研究者收集了31例HCC患者在Y90治疗前、治疗后1、3、6个月的PBMCs。将患者分为两组：持续应答组SRs（治疗后6个月内无PD）、非应答组NRs/短暂应答组TRs（治疗后3个月时PD/治疗后3个月应答但6个月内PD）。

将Y90治疗前后的免疫细胞亚群进行对比发现，Y90治疗后1个月时CD8+Tim-3+和CD4+T细胞的TNF-α表达增加，治疗后3个月时CD14+HLADR+APCs的比例增加，尤其在SRs组，提示免疫激活。此外，在治疗后3个月，SRs组的这些T细胞亚群的TNF-α表达显著高于NRs/TRs组。该结果与Y90治疗组肿瘤NGS显示的抗原提呈通路激活是一致的。

Y90治疗后1、3个月时PBMCs中检测到的与临床应答相关的免疫反应

5.PD-1和Tim-3高表达，预测Y90治疗的持续应答

对比SRs与NRs/TRs发现，在治疗前和治疗后3个月，SRs组的PD-1和Tim-3均有高表达，以及更高比例的PD-1表达和Tim-3表达的CD8+T细胞。值得注意的是，SRs组的Tim-3+CD8+T细胞的高表达持续到治疗后6个月时仍存在。这些免疫耗竭标志物的持续高表达可能提示SRs组的外周血中T细胞高度激活，从而介导对Y90的持续应答。相反，NRs/TRs组在治疗前后富集了更多的CD4+Foxp3+CD152+Treg细胞、以及不表达PD-1和Tim-3的T细胞。

SRs组与NRs/TRs组的不同T细胞亚群

为比较SRs组和NRs/TRs组的这些耗竭性T细胞的功能性，将这些细胞进行体外实验，分析PD-1+CD8+ 或Tim-3+CD8+ T细胞的细胞因子表达，观察到NRs/TRs组在治疗后3个月时促炎性细胞因子、IFN-γ和TNF-α显著降低，而SRs没有。提示SRs组的T细胞仍保留功能性，当受到肿瘤抗原激活时仍具备抗肿瘤活性。

NRs/TRs组在治疗后3个月IFN-γ+TNF-α+T细胞显著降低

6.持续应答者的T细胞表达特异性的归巢受体、CCR5和CXCR6

在治疗前和治疗后3个月时，SRs组也观察到更多趋化因子受体表达（CCR5和CXCR6）的表达。治疗后1个月时，CCR5和CXCR6表达下降提示激活的免疫细胞向肿瘤部位募集。

SRs组患者的CXCR6+和CCR5+ CD8 T细胞亚群

7.基于治疗前PBMCs免疫谱，构建持续应答预测模型

基于外周血中免疫标志物表达的不同，可以区分持续应答和非持续应答的患者。研究者使用Y90治疗前PBMCs的免疫细胞谱构建了预测持续应答的模型，训练集和验证集的预测准确性分别为95.5%和75.0%。

持续应答预测模型的构建和验证

小结

该研究表明，Y90可诱导肿瘤内浸润性免疫细胞和外周血单核细胞的一系列免疫应答。在Y90治疗的肿瘤内，表达颗粒酶B的CD8+NK和NKT细胞增加，而未经Y90治疗的肿瘤内，免疫抑制性的Treg细胞增加。Y90诱导趋化因子上调，可能促进CD8+T细胞的募集和激活。在Y90治疗后1个月和3个月，外周血中表达TNF-α和颗粒酶B的免疫细胞亚群、以及抗原提呈细胞激活，这些免疫表达谱有望作为Y90治疗后临床应答的生物标志物。

Y90激活局部和系统免疫，诱导持续的临床应答

Y90诱导的免疫激活促成了患者对Y90治疗的持续临床应答，同时也启示Y90与免疫治疗可能存在协同效应。基于此，Pierce K H Chow教授也发起了一项钇90树脂微球联合A+T的随机对照研究（NCT05377034）。期待未来开展更多研究，进一步探索钇90持续应答的预测标志物，并开发更好的联合治疗策略，造福更多肝癌患者。返回搜狐，查看更多